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基因编辑

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项目介绍

基因编辑技术-CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats),通过对预设的DNA位点进行切割,造成DNA双链断裂,随后细胞启动修复机制,在修复过程中可以产生基因定点修改或基因转入,实现基因敲除、基因敲进、基因替换、点突变等。 周期短,能够快速地对影响目标性状的关键基因进行精确编辑,在最短的时间内得到我们需要的基因型。


一、高活性SgRNA筛选实验服务

SgRNA是CRISPR基因敲除敲入系统中重要的组成部分,挑选最佳的     SgRNA仍然是目前所碰到的难题,公司结合生物信息分析构建高活 性的SgRNA。


二、SgRNA-Cas9 重组载体构建

公司所用Cas9已经经过优化,并在两端都含有细胞核定位信号。具有效率高,脱靶率低,方便快捷的特点。


三、SgRNA-Cas9-XFP 荧光蛋白重组载体构建

载体中包含一个以荧光蛋白(XFP)作为筛选标记,分别可表达GFP、RFP、BFP、IFP等荧光蛋白。


四、SgRNA-Cas9-XR抗性蛋白重组载体构建

载体中包含一个以抗性蛋白作为筛选标记,分别可表达Puromycin、Neomycin、 Zeomycin、Hygromycin和Blasticidin等抗性蛋白。


五、高效knock-out载体构建

利用CRISPR/Cas9技术将特定基因插入到靶基因的编码区内,并终止转录,从而达到使靶基因失活的效果。


六、高效GFP-knock-in载体构建

利用CRISPR/Cas9技术将GFP插入到靶基因的C端,利用靶基因和GFP形成的融合蛋白可以定位和研究靶基因的特性。


服务流程

(对于模式植物拟南芥,我们提供一揽子解决方案,您只需要提供靶基因编号,我们提供全程实验各步骤结果。您可以选择接受T2代(杂合突变体,携带sgRNA/Cas9转基因插入序列)或T3代(纯合突变体,分离掉sgRNA/Cas9 转基因插入序列)的种子。对于其他物种,我们可提供前期靶点预测、靶点效率评估、载体构建及后期突变体鉴定服务。)

可提供结果内容

A基因敲除载体的图谱、全序列和注释信息;

B 各靶点的敲除株系(每个靶点不低于5株);

C 每个敲除系的测序结果。

D 实验报告



服务内容及周期

服务内容

周期

价格

 

质粒构建

2-3周

2000元/靶点

 

多靶点

2-4周

2000+1500元/每增加1靶点

 

对于拟南芥

周期

价格

鉴定line

T2代

16周

5000元/靶点

5

T3代

20周

7000元/靶点

5


常见问题