免疫印迹（western blot）是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现在已成为蛋白分选的一种常规技术。常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分选。

样本要求

顾客提供组织、细胞、蛋白质溶液等，一抗（公司抗体库存里若没有），干冰或者液氮保存寄送。样本请注意应避免各类污染和反复冻融。

（1）告知蛋白质浓度及电泳上样量

（2）原始胶片、电子图片及图片分析结果

（3）完整的实验报告，包括实验步骤，使用试剂和仪器等

（1）未扩出目的条带

目的蛋白的表达量过低；

一抗或者二抗效价不足；

转膜效率低；

（2）背景过高

封闭条件不合适；

一抗/二抗浓度过高；

抗体与封闭剂发生交叉反应；

洗膜不足；

（3）非特异性条带

一抗质量不佳；

目的蛋白被修饰或者降解，与目的蛋白有共同检测表位的剪切体或同一家族成员，目的蛋白可能形成多聚体；

一抗或者二抗浓度过高；

（4）条带弯曲不平整

电泳迁移速度过快或迁移温度过高